原位杂交在前。

（1）常规脱蜡入水。

（2）37℃蛋白酶K消化20min，37℃漂洗液充分洗去蛋白酶K。

（3）滴加探针，加盖玻片，避光、湿盒、37℃过夜孵育。

（4）如果试剂盒允许的话，将试剂盒中洗脱液水浴加温至37℃震荡洗脱多余的探针。

（5）加碱性磷酸酶标记的抗1体，37℃孵育半小时，洗去抗1体后显色。

免1疫组化在后。

（1）将显色后确认为阳性的切片充分漂洗。

（2）在PH为6.0的枸橼酸钠溶液中，微波至96℃左右，作用10min。

（3）滴加一抗，原位杂交技术服务公司，37℃湿盒孵育2h。

（4）充分漂洗切片，滴加二抗，室温下孵育40-50min。

（5）DAB显色后，采用PBS中止显色反应。

（6）不要复染核，不然就盖住原位杂交信号了。

武汉迈斯普生物科技有限公司是一家专业从事生物医学技术服务、技术咨询及产品开发的生物技术服务企业。公司坐落于武汉光谷，由3位归国博士领衔创办。公司长期致力于建立并完善多项基础生物技术服务平台。现凭借自身技术特色，依托光谷生物城技术产业优势，面向全国提供的生物技术服务。

主要原因是由于BD融合诱饵蛋白有单独作用，或者这种融合蛋白的作用被外来蛋白。另外AD融合靶蛋白如果有DNA的特异性结合，则也可单独报告基因的表达。因此，为排除假阳性就需要作严格的对照试验。
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FISH技术作为连接分子生物学与细胞生物学的桥梁地位已为世人所公认。尽管目前FISH技术无法达到百100 完全杂交，特别是在应用较短cDNA探针时存在杂交效度率明显下降的问题，但随着各种新型分子探针以及更为精密的光学显微镜和功能强大的计算机分析系统的不断问世，上述问题将会逐步得到解决，该技术的作用正变得日版益重要，应用领域也得以不权断扩展。FISH技术在泌尿系统研究领域的巨大潜力与光明前景将我们进入全新时代。

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